您的位置:首页 >知识达人 >

研究人员在实验室中面临蛋白质颗粒的潜在危险

帕金森病 (PD) 患者的大脑中发现了路易体和路易神经突。它们主要由蛋白质 α-突触核蛋白 (α-Syn) 的原纤维组成,可在体外自组装成原纤维。如果进入人体,这些种子可以充当朊病毒并引发有毒蛋白质沉积物的形成。由于 α-Syn 原纤维经常用于研究,因此重要的是不要将其意外转移到人类或细胞培养物中。研究人员在《帕金森病杂志》上发表的报告描述了三种有效去除和分解这些 α-突触核蛋白种子的清洁程序。

α-Syn 被纯化并在试管中组装成原纤维,用于在大量实验室中研究/模拟模型动物(从线虫(线虫)到啮齿动物和非人类灵长类动物)的 PD 发病机制。这些实验室通常包含由塑料、玻璃、铝或不锈钢制成的表面和非一次性物品。这些物品通常很粗糙,有些区域无法通过擦拭完全清洁。因此,通过有效的清洁程序最大限度地减少污染非常重要。

“包括我们在内的几个团队证明,纤维状 α-Syn 从一个细胞(包括神经元)传播到另一个细胞,并在这一传播过程中进行扩增,模仿朊病毒粒子的行为。这些观察结果表明,纤维状 α-Syn 并非无害,”首席研究员解释道Ronald Melki 博士,法国国家科学研究中心巴黎萨克雷神经科学研究所(法国伊维特河畔吉夫)研究主任。

研究人员将荧光标记的原纤维和 α-Syn 丝带的溶液应用于模仿实验室条件的粗糙表面。这些液滴很容易被肉眼看到,并且可以通过它们的荧光进行评估。

测试了五种清洁溶液:1)次氯酸钠(20,000 ppm);2)氢氧化钠(1N),3)十二烷基硫酸钠(SDS,1%,W/V);4)Hellmanex(1%,V/V);5) TFD4(1%,V/V)。作为对照,仅用商业制备的纯水清洗表面。清洁后,通过荧光测量残留在表面上的小集合体、原纤维和α-Syn带的量。为了评估从表面洗掉的α-Syn原纤维是否被破坏,将原纤维和丝带在各种清洁溶液中孵育一小时,并测量剩余原纤维的量。

研究人员发现,商业洗涤剂 Hellmanex 和 SDS(1%,W/V)是最适合去除和中和受污染表面的 α-Syn 种子的清洁试剂。然而,次氯酸钠(20,000 ppm)或氢氧化钠(1N)溶液先前被证明可以降低朊病毒的感染性,但效果不佳。白开水同样无效。

免责声明:本文由用户上传,如有侵权请联系删除!